Preview

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии

Расширенный поиск
№ 6 (2017)
Скачать выпуск PDF
https://doi.org/10.36233/0372-9311-2017-6

3-9 120
Аннотация
Цель. Изучение дитотоксического воздействия штаммов Yersinia pestis с различной степенью вирулентности на лейкоциты цельной дефибринированной крови человека. Материалы и методы. В работе использовано 15 штаммов Y. pestis. ДНК-гистограммы регистрировали с помощью проточного цитофлуориметра. Результаты. Экспериментально обоснована возможность использования показателя цитотоксичности для дифференциации штаммов Y. pestis на вирулентные и авирулентные. Полученные данные сопоставимы с показателем LD5o для мышей и не противоречат молекулярно-генетическим характеристикам штаммов. Заключение. Предлагаемый подход позволяет получать достоверные результаты и является перспективным для оценки вирулентности штаммов Y. pestis.
10-15 118
Аннотация
Цель. Характеристика численности и распространения комаров Ae. aegypti и Ae. albopictus в Республике Абхазия и оценка риска распространения вируса Зика. Материалы и методы. Учет численности комаров проводили методом «на наблюдателя» за 20 минут на 70 точках природных ландшафтов в апреле-октябре 2016 г. Результаты. Черноморское побережье Республики Абхазия имеет благоприятные экологические условия для укоренения комаров Ae. aegypti и Ae. albopictus. В 2016 г. комары Ae. albopictus, обладающие векторной компетентностью распространять вирус Зика, выявлены в от-крытых стациях на территории от Очамчирского района до границы с Российской Федерацией. Численность их коррелировала с температурой воздуха в регионе. Контроль эффективности инсектицидных работ показал, что в открытых стациях в течение 3 - 7 дней после дезинсекционных мероприятий комары Ae. albopictus не обнаруживались. Однако затем численность восстанавливалась в результате заселения из близлежащих природных биотопов. Заключение. В настоящее время риск местной передачи вируса Зика на территории Республики Абхазия опенен нами как «низкий». В то же время, с учетом серьезности болезни, вызываемой вирусом Зика, необходимо проведение более широкого комплекса методов контроля численности комаров в ареалах их обитания, особенно на эпидемиологически значимых объектах. Наиболее эффективной мерой зашиты населения являются санитарная очистка территории и ликвидация мест размножения комаров.
15-20 160
Аннотация
Цель. Изучение молекулярно-генетических особенностей MRSA, вызывающих гнойно-воспалительные осложнения у онкологических больных. Материалы и методы. В работе использованы бактериологический метод, молекулярно-генетические методы - ПЦР. М-ПЦР, секвенирование. Результаты. Доля MRSA среди стафилококковых инфекций у онкологических больных в 2003 - 2007 гг. составила 37,6%, а в 2010 - 2015 гг. возросла до 51.3%. При исследовании молекулярно-генетических особенностей выделенных штаммов MRSA установили наличие двух основных клонов: ST239/spa3(t037)/SCCmecIfIA и ST8/ spai(t008)/SCCmecIVc. Представители клонов отличались уровнем резистентности к антибактериальным препаратам. Заключение. У онкологических больных в Красноярске выявлено распространение двух вариантов MRSA -- ST239i<ras и ST8Kras, соответствующих вариантам, распространенным в Красноярском крае.
21-25 102
Аннотация
Цель. Изучение влияния антимикробных пептидов (АМП) на чувствительность условно патогеннных микроорганизмов к действию антагонистически активных представителей мутуалистической микрофлоры. Материалы и методы. В исследовании использовали пептиды из тромбоцитов кур, полученные методом обращеннофазовой высокоэффективной жидкостной хроматографии в ступенчатом и линейном градиентах увеличения концентрации органического растворителя. Влияние АМП на чувствительность микроорганизмов к антагонистически активным веществам доминантных бактерий рода Lactobacillus и Enterococcus исследовали при совместном инкубировании. Антагонистическую активность бактерий изучали чашечным методом. Результаты. Показано усиление экспрессии антагонистической активности индигенной микрофлоры в отношении ассоциативной микрофлоры после ее соинкубирования с пептидными фракциями из тромбоцитов кур. Заключение. Полученные результаты позволяют предположить существование новых механизмов формирования колонизационной резистентности биотопа.
25-31 173
Аннотация
Цель. Изучение современных проявлений манифестного и скрыто протекающего эпидемического процесса Эпштейна-Барр инфекции, а также выявлении ее особенностей среди женщин детородного возраста и новорожденных. Материалы и методы. Проведен эпидемиологический анализ заболеваемости инфекционным мононуклеозом и ВИЧ-инфекцией в Российской Федерации. Изучены тенденции динамики заболеваемости, ее распределение по территориям и возрастным группам. На неблагополучной территории проведено изучение частоты выявления маркеров инфицирования у женщин фертильного возраста, в т.ч. ВИЧ-инфицированных беременных, а также новорожденных. Результаты. Установлено, что несмотря на сложности диагностики, заболеваемость инфекционным мононуклеозом следует рассматривать как индикатор манифестно протекающего эпидемического процесса Эпштейна-Барр инфекции. У беременных ВИЧ-инфицированных женщин, в отличие от здоровых беременных, маркеры острой инфекции, протекавшей без клинических проявлений, наблюдались достоверно чаще. Максимальная интенсивность активно протекающего эпидемического процесса выявлена среди беременных 15 - 19 лет, находящихся в латентной стадии течения ВИЧ-инфекции с заражением при внутривенном введении наркотиков. В более старших возрастных группах беременных наблюдалась реинфекция. Высокая инфицированность новорожденных, а также обнаружение маркеров острой инфекции свидетельствуют о необходимости дальнейших исследований с целью получения строгих доказательств вертикальной передачи возбудителя. Заключение. Получены доказательства высокой активности эпидемического процесса Эпштейна-Барр инфекции среди женщин фертильного возраста. Максимальная частота маркеров инфицирования выявлена среди ВИЧ-инфицированных беременных, что повышает риск внутриутробного инфицирования плода и новорожденных.
32-37 175
Аннотация
Цель. Оценка и выявление современных особенностей распространения норовирусной инфекции в г. Москва, на окружном и городском уровне. Материалы и методы. Проводился ретроспективный анализ динамики показателей заболеваемости НВИ по данным форм государственной статистической отчетности за период 2009 - 2016 гг. Результаты. Заболеваемость НВИ за период 2009 - 2016 гг. характеризуется тенденцией к росту как на городском, так и на окружном уровне г. Москва. Заболевание регистрируется преимущественно среди детей (78% в Юго-Восточном округе (ЮВАО) Москвы, 80% в Москве и 81 % в РФ) на фоне увеличения доли взрослых в (до 42,7% в Москве и 13,9% в РФ) в 2016 году. На динамику заболеваемости в различных возрастных группах детского населения оказывала влияние вспышечная заболеваемость. В 2011 - 2016 гг. в Москве было зарегистрировано 33 очага НВИ (24,3% от всех вспышек ОКИ в Москве за данный период), из них 64,3% обусловлены контактно-бытовым путем и 35,7% пищевым. Вспышки чаще регистрировались в детских организованных коллективах (69,7%). Заключение. В Москве наблюдается тенденция к росту заболеваемости НВИ с увеличением доли взрослого населения. Основной вклад в групповую заболеваемость вносят дети 7 - 14 и 15 - 17 лет. Подъем заболеваемости по НВИ в Москве в 2016 году, возможно, связан с отсутствием эффективных мер профилактики. Ввиду отсутствия средств рутинной диагностики, сохраняется тенденция к проведению обследования на НВИ, фактически только в очагах. Основной причиной формирования очагов групповой заболеваемости Н ВИ по-прежнему является нарушение санитарно-противоэпидемического режима.
37-42 163
Аннотация
Цель. Исследовать влияние термостабильного (ТСТ) и термолабильного (ТЛТ) летальных токсинов Yersinia pseudotuberculosis на формирование биопленки этими бактериями. Материалы и методы. Для выделения токсинов и проведения экспериментов использовали штамм Y. pseudotuberculosis 512 (рУУ48МД, рУМ82МД) и штамм 2517, несущий плазмиду вирулентности pYV и утративший ее. Результаты. В присутствии ТЛТ наблюдалась стимуляция образования биопленки при 20°С как штаммом 2517 (pYV+), несущим плазмиду вирулентности, так и бесплазмидным штаммом 2517 (pYV). При низкой положительной температуре (6 - 8°С) ТЛТ снижал количество сформированной биопленки. ТСТ ингибировал образование биопленки обоими исследуемыми штаммами Y. pseudotubercuiosis при инкубации в течение 3 суток при 20°С и 6 - 8°С. Со снижением температуры степень ингибирования уменьшалась. Заключение. Оба белковых токсина Y. pseudotuberculosis влияют на формирование биопленки бактериями псевдотуберкулеза, однако воздействие ТЛТ и ТСТ на процессы образования биопленки различаются, и механизм такого действия токсинов предстоит выяснить.
42-49 159
Аннотация
Цель. Оценить пул E.coli внутри пораженной зоны кишечника пациентов с болезнью Крона. Материалы и методы. Клинические изоляты (28), а также контрольные образцы были протестированы относительно их возможной принадлежности к определенной филогенетической группе, способности к адгезии и инвазии на модели монослоя эпителиальных клеток СаСо2, способности к формированию биопленки и подвижности. Результаты. Было показано, что E.coli, высеянные из различного биоматериала, отличались по филогенетической принадлежности и способности образовывать биопленку. E.coli, относящиеся к типу адгезивно-инвазивных, обнаруживались преимущественно в материале биопсии слизистой кишечника пациентов с болезнью Крона. Заключение. Есть основания полагать, что тип адгезивно-инвазивных E.coli сложился на стыке экологических ниш просвета и стенки кишечника.
49-55 115
Аннотация
Цель. Исследование влияния методов иммобилизации эритропоэтина на чувствительность выявления специфических IgG к человеческому эритропоэтину (чЭПО) в сыворотках крови экспериментальный животных. Материалы и методы. В работе использовали сыворотки крови кроликов и морских свинок, полученных после введения препаратов эритропоэтина. Схемы иммуноферментного метода включали варианты пассивной иммобилизации человеческого рекомбинантного эритропоэтина (чрЭПО) на планшете и два варианта иммунохимической иммобилизации: связывание биотинилированного чрЭПО в лунках планшета с пассивно иммобилизованным стрептавидином и связывание чрЭПО с пассивно иммобилизованными на планшетах антителами к эритропоэтину. Результаты. Показано, что иммунохимическая иммобилизация приводит к повышению чувствительности в диапазоне от 2 до 10 раз при выявлении антител к чЭПО по сравнению с пассивной иммобилизацией. Заключение. Полученные результаты свидетельствуют о значительном влиянии метода иммобилизации чрЭПО на чувствительность выявления антител к чЭПО. При выявлении антител к нативным конформационным эпитопам иммунохимическая иммобилизация является предпочтительной.
56-63 129
Аннотация
Цель. Получение универсальных генетических конструкций, кодирующих синтез легкой и тяжелой цепей химерного антитела, а также методических подходов для получения химерных антител заданной специфичности на примере моноклональных антител к дифтерийному токсину (ДТ) DT -17 в культуре клеток СНО и оценка их иммунохимических и эффекторных свойств. Материалы и методы. Методом ПЦР были получены гены вариабельных областей легких и тяжелых цепей мышиного антитела к дифтерийному токсину DT -17 и клонированы в плазмидном векторе pCI-neo. Генно-инженерными методами был получен «супервектор» SV DT-17neo, содержащий гены химерного антитела. С использованием культуральных методов «супервектором» была трансфицирована культура клеток СНО и получен высокопродуктивный клон, секретирующий химерные антитела к ДТ. Для оценки активности антител применяли иммунохимические методы, а для получения препаративного количества антител - аффинную хроматографию. Результаты. Были получены универсальные векторы pLK DT-17 и pHG DT-17, содержащие гены легкой и тяжелой цепей химерного антитела к ДТ DT-17, где гены вариабельных и константных областей были фланкированы сайтами рестрикции эндонуклеаз, что позволяет изменять специфичность антител, а в перспективе даст возможность перейти к исследованиям по изменению класса и видовой принадлежности химерного иммуноглобулина. При трансфекции культуры клеток СНО полученными векторами отмечалось накопление антител к ДТ в культуральной жидкости. Выход очищенных химерных антител DT-17 составил 4 мг с 1 л культуральной среды. Минимальная концентрация химерных антител, при которой наблюдалась нейтрализация ДТ в культуре клеток СНО, составила 30 мкг/ мл среды. Заключение. Были сконструированы универсальные плазмиды, кодирующие синтез легкой и тяжелой цепей химерного антитела DT-17. На основе векторов был получен «супервектор» и высокопродуктивный клон, секретирующий специфические антитела, которые обладали нейтрализующей активностью в отношении ДТ.
63-72 122
Аннотация
Цель. Получение рекомбинантного аналога полноразмерного белка ORF3 вируса гепатита Е (ВГЕ) 1 генотипа. Материалы и методы. Штаммы Escherichia coli, плазмидные векторы, серологический и клинический материал, иммуноферментные тест-системы. Молекулярно-биологические, биоинформационные, биотехнологические, биохимические и серологические методы. Результаты. Из препарата РНК ВГЕ 1 генотипа, выделенного от больного из Киргизии, получена рекомбинантная плазмида, содержащая ДНК копию субгеномной вирусной РНК. С использованием данной плазмиды получены штаммы E.coli - продуценты рекомбинантного антигена ORF3 ВГЕ 1 генотипа в виде слитного с Р-галактозидазой E.coli полипептида, содержащего полноразмерную копию белка ORF3. Для повышения уровня экспрессии рекомбинантного белка проведена оптимизация кодонов клонированного фрагмента кДНК. Рекомбинантный белок ORF3 выделен из телец-включений биомассы штамма-продуцента и очищен методом эксклюзионной хроматографии. Антигенная специфичность полученного полипептида подтверждена методами иммуноферментного анализа и вестерн-блоттинга со специфическими сыворотками. Заключение. Разработан рекомбинантный антиген ORF3 ВГЕ 1 генотипа и экспериментально показана возможность его применения в диагностических тестах.
72-80 230
Аннотация
Цель. Разработка рекомбинантного аналога капсидного белка вируса гепатита Е (ВГЕ) 1 генотипа и исследование его антигенных свойств. Материалы и методы. Штаммы Escherichia coli, плазмидные векторы, серологический и клинический материал, иммуноферментные тест-системы. Молекулярно-биологические, биоинформационные, биотехнологические, биохимические и серологические методы. Результаты. С использованием рекомбинантной плазмиды, содержащей ДНК-копию субгеномной бицистронной РНК ВГЕ 1 генотипа, получен штамм E.coli - продуцент рекомбинантного антигена ORF2, содержащего С-концевой фрагмент капсидного белка ВГЕ в виде слитного с (3-галактозидазой E.coli полипептида. Рекомбинантный белок выделен из телец включений биомассы штамма-продуцента и очищен методом эксклюзионной хроматографии. С помощью вестерн-блоттинга показано взаимодействие полученного полипептида с пулом сывороток крови больных гепатитом Е (ГЕ). Антигенная специфичность белка подтверждена методом иммуноферментного анализа с сыворотками крови больных ГЕ и реконвалесцентов и групп сравнения: здоровых доноров, больных гепатитами А, В, С, ВИЧ-инфицированных, больных инфекционным мононуклеозом и цитомегаловирусной инфекцией. Заключение. Разработан рекомбинантный антиген ORF2 ВГЕ 1 генотипа и экспериментально показана возможность его применения в диагностических тестах.
80-87 126
Аннотация
Цель. Исследование влияния пробиотических бактерий Lactobacillus plantarum 8РАЗ и Escherichia coli Ml7 и липополисахаридов на ультраструктуру плотных контактов энтероцитов слизистых оболочек тощей кишки крыс. Материалы и методы. В работе применяли липополисахарид Escherichia coli (Sigma-Aldrich, Германия) и пробиотические бактерии L. plantarum 8РАЗ и Е. coli Ml7. Исследование выполняли на крысах самцах линии Wistar. Сравнительный анализ ультратонкого строения энтероцитов и плотных контактов проводили при последовательной инкубации тощей кишки крыс с пробиотическими бактериями L. plantarum 8РАЗ и Е. coli М17, липополисахаридами и комплексом указанных бактерий с липополисахаридами. Результаты. Воздействие L. plantarum 8РАЗ на слизистую оболочку тощей кишки крыс по ряду признаков оказалось сходным с действием Е. coli Ml7, что проявлялось в сохранении интактной структуры межклеточного пространства и плотных контактов. При этом обнаруженные в цитоплазме энтероцитов полые сферические включения с фрагментами бактерий, окруженных мембранами, свидетельствовали о возможности проникновения пробиотических бактерий через слизистую оболочку тощей кишки трансцеллюлярным путем. При одновременном воздействии на энтероциты тощей кишки комплекса из пробиотических бактерий с липополисахаридами деструктивных изменений в структуре плотных контактов не отмечали, однако в значительном числе случаев бактериальные клетки обнаруживались в межклеточном пространстве рядом с бокаловидными клетками. Заключение. Выявлен сходный характер воздействия грамположительных бактерий L. plantarum 8РАЗ и грамотрицательных бактерий Е. coli М17 и их комплексов с липополисахаридами на плотные контакты эпителиоцитов тощей кишки. На основании морфологического анализа высказано предположение о возможном влиянии липополисахаридов на участие пробиотических бактерий в парацеллюлярном транспорте, однако в отсутствие липополисахаридов пробиотические бактерии, возможно, проникали через слизистую оболочку тощей кишки крыс трансцеллюлярным путем.
88-94 188
Аннотация
Цель. Оценка динамики изменения структуры популяции возбудителя туберкулеза в Иркутской области на основе сравнительной характеристики генотипов микобактерий туберкулеза, полученных от больных из контрастных возрастных групп. Материалы и методы. С помощью 24-локусного MIRU-VNTR типирования были охарактеризованы 588 эпидемически не связанных штаммов микобактерий туберкулеза (МБТ), выделенных от 567 больных туберкулезом (ТБ), из которых 160 штаммов принадлежали пациентам из контрастных возрастных групп. Из них 59 штаммов были выделены от «молодых» больных ТБ, родившихся после 1990 года, и 101 изолят от родившихся до 1955 года включительно. Результаты. Две трети выборки образцов МБТ (427/567) принадлежало генотипу Beijing с доминированием двух его субтипов, принадлежащих современным эпидемически распространяющимся в мире клональным комплексам СС1 и СС2. Высокий уровень кластеризации профилей этих вариантов генотипа Beijing у «пожилых» и «молодых» пациентов в Иркутской области свидетельствует о наличии стойкого очага инфекции и активной трансмиссии на протяжении последних 50 лет.

ОБЗОРЫ 

95-105 678
Аннотация
В обзоре даны современные сведения о строении, генетическом разнообразии и факторах патогенности пневмовирусов - респираторно-синцитиального вируса человека (PC-вируса) и метапневмовируса человека, в связи с образованием нового семейства Pneumoviridae по решению международного совета по таксономии вирусов в 2016 году Представлены результаты собственных клинико-эпидемиологических исследований в сравнении с данными литературы. Выявлена цикличность циркуляции РС-вируса. Проведено сравнение клинико-эпидемиологических характеристик данных инфекций. Показана лидирующая роль PC-вируса при ОРВИ детей и значимость метапневмовируса как этиологического агента респираторной инфекции взрослых. Подчеркивается важная роль обоих вирусов в развитии инфекций нижних отделов дыхательных путей. Проанализированы факторы, способствующие широкой распространенности PC-вируса у больных ОРЗ детей. Рассмотрены аспекты профилактики данных инфекций.
105-113 128
Аннотация
В настоящее время Африканский континент является одним из наиболее пораженных холерой регионов мира. Ежегодно холерой в Африке заболевают более 55 000 человек. В обзоре проведен сравнительный анализ эпидемических проявлений текущей пандемии, вызванной холерными вибрионами Эль Тор биовара, и шести предыдущих пандемий, вызванных холерными вибрионами классического биовара. Рассмотрены причины масштабного распространения холеры на Африканском континенте в современный период и проблемы ее профилактики.

АКТУАЛЬНЫЕ ПРОБЛЕМЫ НАУКИ 

114-126 1069
Аннотация
Инфекции, вызываемые условно патогенными микроорганизмами (УПМ), занимают особое положение. В микробных ассоциациях УПМ проще реализовать свой невысокий патогенный потенциал, потенциируя свойства друг друга. Группа полиэтиологичных инфекций, вызываемых УПМ, достаточно разнообразна с точки зрения нозоформ и нозогрупп. В их число входят так называемые гнойно-септические инфекции (ГСИ), которые также весьма разнообразны и по клинико-эпидемиологическим, и этиологическим характеристикам. Научные данные демонстрируют актуальность проблемы полиэтиологичных инфекций, особенно в хирургии, и свидетельствуют об отсутствии систематизированных данных о всем спектре и составе микробных ассоциаций при разных инфекциях, количественной оценки, недостаточном изучении свойств с сравнении с моновозбудителями. Проблема полиэтиологичных инфекций практически не изучена с эпидемиологических позиций, только единичные исследования посвящены изучению внутрибольничного инфицирования микробными ассоциациями, не разработан микробиологический мониторинг. В связи с этим, требуется комплексное исследований полиэтиологичных инфекций в сравнении с моноэтиологичными для выявления особенностей и разработки эпиднадзора и контроля.

СОДЕРЖАНИЕ 



Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0372-9311 (Print)
ISSN 2686-7613 (Online)