Журналов:     Статей:        

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2020; 97: 182-189

Молекулярно-генетическое исследование штамма Ленинград-16, используемого для производства вакцины кори

Игнатьев Георгий Михайлович, Отрашевская Елена Викторовна, Суханова Лидия Львовна, Сидоренко Елена Серафимовна, Нетесова Нина Александровна

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2020-97-2-182-189

Аннотация

Целью данной работы было изучение генетической стабильности производственного штамма Ленинград-16 (Л-16) вируса кори, используемого для производства вакцины АО «НПО «Микроген».

Материалы и методы. В исследовании использованы серии производственного и посевного штаммов Л-16 (АО «НПО «Микроген»), готовые серии вакцин кори различных производителей, штамм генотипа D6 вируса кори. Молекулярно-генетическое исследование штаммов проведено с применением полимеразной цепной реакции с обратной транскрипцией, последующей рестрикцией и секвенированием.

Результаты. Получены полногеномные последовательности производственного и посевного штаммов Л-16 для производства вакцины. Последовательность вакцинного штамма представлена в GenBank. Штамм Л-16 генетически стабилен. Полученные данные позволили продемонстрировать возможность использования метода ОТ-ПЦР с последующей рестрикцией для подтверждения подлинности вакцинного штамма Л-16 в готовых моно- и трехкомпонентных формах вакцин.

Заключение. Результаты проведенного исследования позволяют предположить возможность применения молекулярно-генетических методов для подтверждения подлинности изученных штаммов не только на этапах производства, но и в готовых сериях вакцин.

Список литературы

1. Moss W. Measles. Lancet. 2017; 390(10111): 2490-502. DOI: http://doi.org/10.1016/S0140-6736(17)31463-0

2. Measles virus nomenclature update: 2012. Wkly Epidemiol. Rec. 2012; 87(9): 73-81.

3. Bankamp B., Takeda M., Zhang Y., Xu W., Rota P.A. Genetic characterization of measles vaccine strains. J. Infect. Dis. 2011; 204(Suppl. 1): S533-48. DOI: http://doi.org/10.1093/infdis/jir097

4. Borges M.B., Caride E., Jabor A.V., Malachias J.M., Freire M.S., Homma A., et al. Study of the genetic stability of measles virus CAM-70 vaccine strain after serial passages in chiсken embryo fibroblast primary cultures. Virus Genes. 2008; 36(1): 35-44. DOI: http://doi.org/10.1007/s11262-007-0173-1

5. Tillieux S.L, Halsey W.S, Sathe G.M, Vassilev V. Comparative analysis of the complete nucleotide sequences of measles, mumps, and rubella strain genomes contained in Priorix-Tetra and ProQuad live attenuated combined vaccines. Vaccine. 2009; 27(16): 2265-73. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2009.01.112

6. Zhang Y., Zhou J., Bellini W., Xu W., Rota P.A. Genetic characterization of Chinese measles vaccines by analysis of comple tegenomic sequences. J. Med. Virol. 2009; 81(8): 1477-83. DOI: http://doi.org/10.1002/jmv.21535

7. Отрашевская Е.В., Букин Е.К., Красильников И.В., Игнатьев Г.М. Специфический гуморальный иммунитет после однократной иммунизации паротитной вакциной: результаты трехлетнего наблюдения. Вопросы вирусологии. 2011; 56(3): 45-8.

8. Atrasheuskaya A.V., Kulak M.V., Neverov A.A., Rubin S., Ignatyev G.M. Measles cases in highly vaccinated population of Novosibirsk, Russia, 2000–2005. Vaccine. 2008; 26(17): 2111-8. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2008.02.028

9. Kanbayashi D., Kurata T., Takahashi K., Kase T., Komano J. A novel cell-based high throughput assay to determine neutralizing antibody titers against circulating strains of rubella virus. J. Virol. Methods. 2018; 252: 86-93. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jviromet.2017.11.011

10. McLean H.Q., Fiebelkorn A.P., Ogee-Nwankwo A., Hao L., Coleman L.A., Adebayo A., et al. Rubella virus neutralizing antibody response after a third dose of measles-mumps-rubella vaccine in young adults. Vaccine. 2018; 36(38): 5732-7. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2018.08.010

11. Xu C.P., Li M.H., He H.Q., Lu Y.Y., Feng Y. Laboratory diagnosis of vaccine-associated measles in Zhejiang Province, China. J. Microbiol. Immunol. Infect. 2017; 50(5): 578–85. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jmii.2015.10.004

12. Игнатьев Г.М., Отрашевская Е.В., Суханова Л.Л., Сидоренко Е.С., Нетесова Н.А. Молекулярно-генетическое исследование штамма RA-27/3, используемого для производства вакцины против краснухи. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2019; (4): 38–46. DOI: http://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-4-38-46

13. Кулак М.В., Белавин П.А., Нетесова Н.А., Юнасова Т.Н., Голикова Л.Н., Бёктемиров Т.А. и др. Дифференциация вакцинного штамма Л-3 от других штаммов вируса паротита методом ОТ-ПЦР. Биопрепараты. Профилактика, диагностика, лечение. 2008; (4): 7-10.

14. Neverov A.A., Riddell M.A., Moss W.J., Volokhov D.V., Rota P.A., Lowe L.E. Genotyping of measles virus in clinical specimens on the basis of oligonucleotide microarray hybridization patterns. J. Clin. Microbiol. 2006; 44(10): 3752-9. DOI: http://doi.org/10.1128/JCM.00998-06

Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2020; 97: 182-189

Molecular genetic analysis of the strain Leningrad-16 used for the production of measles vaccine

Ignatyev Georgy M., Atrasheuskaya Alena V., Sukhanova Lidiya L., Sidorenko Elena S., Netesova Nina A.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2020-97-2-182-189

Abstract

Aim. To study the genetic stability of the measles virus strain Leningrad-16 (L-16) used for the production of vaccine at JSC NPO Mikrogen.

Materials and methods. A series of production and sowing strains of L-16 (JSC NPO Mikrogen), ready-made series of measles vaccines from various manufacturers, and the strain of measles virus genotype D6 were studied. Molecular genetic study of the strains was performed using RT-PCR followed by restriction analysis and sequencing.

Results. The complete genome sequences of the production and sowing strains of L-16 that are used for vaccine production were obtained. The sequence of the vaccine strain was deposited in GenBank. Strain L-16 was confirmed to be genetically stable. The obtained data demonstrated the possibility of using the RT-PCR method with subsequent restriction analysis to confirm the authenticity of the vaccine strain L-16 in finished mono and three component vaccines.

Conclusion. The results of the study suggest the applicability of the molecular genetic methods to confirm the authenticity of the studied strains not only at the production stages, but also in the finished series of vaccines.

References

1. Moss W. Measles. Lancet. 2017; 390(10111): 2490-502. DOI: http://doi.org/10.1016/S0140-6736(17)31463-0

2. Measles virus nomenclature update: 2012. Wkly Epidemiol. Rec. 2012; 87(9): 73-81.

3. Bankamp B., Takeda M., Zhang Y., Xu W., Rota P.A. Genetic characterization of measles vaccine strains. J. Infect. Dis. 2011; 204(Suppl. 1): S533-48. DOI: http://doi.org/10.1093/infdis/jir097

4. Borges M.B., Caride E., Jabor A.V., Malachias J.M., Freire M.S., Homma A., et al. Study of the genetic stability of measles virus CAM-70 vaccine strain after serial passages in chisken embryo fibroblast primary cultures. Virus Genes. 2008; 36(1): 35-44. DOI: http://doi.org/10.1007/s11262-007-0173-1

5. Tillieux S.L, Halsey W.S, Sathe G.M, Vassilev V. Comparative analysis of the complete nucleotide sequences of measles, mumps, and rubella strain genomes contained in Priorix-Tetra and ProQuad live attenuated combined vaccines. Vaccine. 2009; 27(16): 2265-73. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2009.01.112

6. Zhang Y., Zhou J., Bellini W., Xu W., Rota P.A. Genetic characterization of Chinese measles vaccines by analysis of comple tegenomic sequences. J. Med. Virol. 2009; 81(8): 1477-83. DOI: http://doi.org/10.1002/jmv.21535

7. Otrashevskaya E.V., Bukin E.K., Krasil'nikov I.V., Ignat'ev G.M. Spetsificheskii gumoral'nyi immunitet posle odnokratnoi immunizatsii parotitnoi vaktsinoi: rezul'taty trekhletnego nablyudeniya. Voprosy virusologii. 2011; 56(3): 45-8.

8. Atrasheuskaya A.V., Kulak M.V., Neverov A.A., Rubin S., Ignatyev G.M. Measles cases in highly vaccinated population of Novosibirsk, Russia, 2000–2005. Vaccine. 2008; 26(17): 2111-8. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2008.02.028

9. Kanbayashi D., Kurata T., Takahashi K., Kase T., Komano J. A novel cell-based high throughput assay to determine neutralizing antibody titers against circulating strains of rubella virus. J. Virol. Methods. 2018; 252: 86-93. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jviromet.2017.11.011

10. McLean H.Q., Fiebelkorn A.P., Ogee-Nwankwo A., Hao L., Coleman L.A., Adebayo A., et al. Rubella virus neutralizing antibody response after a third dose of measles-mumps-rubella vaccine in young adults. Vaccine. 2018; 36(38): 5732-7. DOI: http://doi.org/10.1016/j.vaccine.2018.08.010

11. Xu C.P., Li M.H., He H.Q., Lu Y.Y., Feng Y. Laboratory diagnosis of vaccine-associated measles in Zhejiang Province, China. J. Microbiol. Immunol. Infect. 2017; 50(5): 578–85. DOI: http://doi.org/10.1016/j.jmii.2015.10.004

12. Ignat'ev G.M., Otrashevskaya E.V., Sukhanova L.L., Sidorenko E.S., Netesova N.A. Molekulyarno-geneticheskoe issledovanie shtamma RA-27/3, ispol'zuemogo dlya proizvodstva vaktsiny protiv krasnukhi. Zhurnal mikrobiologii, epidemiologii i immunobiologii. 2019; (4): 38–46. DOI: http://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-4-38-46

13. Kulak M.V., Belavin P.A., Netesova N.A., Yunasova T.N., Golikova L.N., Bektemirov T.A. i dr. Differentsiatsiya vaktsinnogo shtamma L-3 ot drugikh shtammov virusa parotita metodom OT-PTsR. Biopreparaty. Profilaktika, diagnostika, lechenie. 2008; (4): 7-10.

14. Neverov A.A., Riddell M.A., Moss W.J., Volokhov D.V., Rota P.A., Lowe L.E. Genotyping of measles virus in clinical specimens on the basis of oligonucleotide microarray hybridization patterns. J. Clin. Microbiol. 2006; 44(10): 3752-9. DOI: http://doi.org/10.1128/JCM.00998-06