Preview

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии (ЖМЭИ)

Расширенный поиск
Доступ открыт Открытый доступ  Доступ закрыт Только для подписчиков

Включение сайт-специфических мутаций в РВ1-ген вирулентного штамма A/WSN/33 (H1N1) вируса гриппа А меняет его фенотипические характеристики

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-6-21-29

Полный текст:

Аннотация

Цель – изучение изменений фенотипических характеристик вирулентного штамма А/WSN/33 вируса гриппа А под влиянием включения сайт-специфических мутаций в его РВ1-гене.

Материалы и методы. С помощью двухступенчатой полимеразной цепной реакции в РВ1-гене штамма А/WSN/33(H1N1) были включены ts-мутации, взятые из генома холодоадаптированных (ХА) штаммов – доноров аттенуации А/Энн Арбор/6/60 (H2N2), А/Ленинград/134/17/57 (H2N2) и А/Краснодар/101/35/59 (H2N2). Исследовали ts- и att-фенотип полученных сайт-специфических мутантов, иммуногенность, а также снижение массы тела у инфицированных мышей.

Результаты. Показано, что включение ts-мутаций из генома ХА штаммов – доноров аттенуации в РВ1-ген вирулентного штамма А/WSN/33 (H1N1) приводит к различным изменениям его фенотипических характеристик.

Обсуждение. Анализ генома ХА штаммов – доноров аттенуации вируса гриппа указывает на исключительно важное значение функциональных дефектов в РВ1-белке для формирования аттенуационного фенотипа вируса.

Заключение. Технологию сайт-специфического мутагенеза можно использовать для модификации РВ1-гена вирулентного штамма вируса гриппа А с целью конструирования живых гриппозных вакцин нового поколения.

Об авторах

В. Ю. Кост
ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
115088, г. Москва, Россия


О. А. Сухова
ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
115088, г. Москва, Россия


И. И. Акопова
ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
115088, г. Москва, Россия


Е. О. Горбачёва
ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
115088, г. Москва, Россия


К. В. Лисовская
ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
115088, г. Москва, Россия


А. А. Ртищев
ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
115088, г. Москва, Россия


С. Г. Маркушин
ФГБНУ НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
Маркушин Станислав Георгиевич, д-р мед. наук, старший научный сотрудник, заведующий лабораторией генетики РНК-содержащих вирусов, 115088, г. Москва


Список литературы

1. Maassab H. Adaptation and growth characteristics of influenza virus at 25 degrees. C. Nature. 1967; 213(5076): 612-4. Doi: https://doi.org/10.1038/213612a0

2. Jin H., Zhou H., Lu B., Kemble G. Imparting temperature sensitivity and attenuation in ferrets to A/PuertoRico/8/34 influenza virus by transferring the genetic signature for temperature sensitivity from cold-adapted A/Ann Arbor/6/60. J. Virol. 2004; 78(2): 995-8. Doi: https://doi.org/10.1128/jvi.78.2.995-998.2004

3. Solórzano A., Ye J., Pérez D.R. Alternative live-attenuated influenza vaccines based on modifications in the polymerase genes protect against epidemic and pandemic flu. J. Virol. 2010; 84(9): 4587-96. Doi: https://doi.org/10.1128/JVI.00101-10

4. Cox A., Dewhurst S. A single mutation at PB1 residue 319 dramatically increases the safety of PR8 live attenuated influenza vaccine in a murine model without compromising vaccine efficacy. J. Virol. 2015; 90(5): 2702-5. Doi: https://doi.org/10.1128/JVI.02723-15

5. Song H., Nieto G., Perez D. A new generation of modified live-attenuated avian influenza viruses using a two-strategy combination as potential vaccine candidates. J. Virol. 2007; 81(17): 9238-48. Doi: https://doi.org/10.1128/JVI.00893-07

6. Zhou B., Li Yo., Speer S., Subba A., Lin X., Wentworth D.E. Engineering temperature sensitive live attenuated influenza vaccines from emerging viruses. Vaccine. 2012; 30(24): 3691-702. Doi: https://doi.org/10.1016/j.vaccine.2012.03.025

7. Алексадрова Г.И., Климов А.И. Живая вакцина против гриппа. СПб.: Наука; 1994.

8. Рекстин А.Р., Дешева Ю.А., Лу Х., Александрова Г.И., Климов А.И., Кац Д.М. и др. Гетеросубтипический иммунный ответ и защита от высокопатогенного вируса гриппа А (Н5N1) у мышей, иммунизированных холодоадаптированным вирусом гриппа А/Ленинград.134/17/57 (Н2N2). Медицинская иммунология. 2005; 7(5-6): 503-10.

9. Rudenko L.G., Arden N.H., Grigorieva E., Naychin A., Rekstin A., Klimov A.I., et al. Immunogenicity and efficacy of Russian live attenuated and US inactivated influenza vaccines used alone and in combination in nursing home residents. Vaccine. 2000; 19(2-3): 308-18. Doi: https://doi.org/10.1016/s0264-410x(00)00153-5

10. Гендон Ю.З., Маркушин С.Г., Цфасман Т.М., Акопова И.И., Ахматова Н.К., Коптяева И.Б. Новые холодоадаптированные штаммы-доноры аттенуации для живых вакцин против гриппа. Вопросы вирусологии. 2013; 58(1): 11-7.

11. Hoffmann E., Neumann G., Kawaoka Y., Hobom G., Webster R.G. A DNA transfection system for generation of influenza A virus from eight plasmids. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2000; 97(11): 6108-13. Doi: https://doi.org/10.1073/pnas.100133697

12. Engler C, Kandzia R, Marillonnet S. A one pot, one step, precision cloning method with high throughput capability. PLoS One. 2008;3(11):e3647.

13. Pflug A., Guilligay D., Reich S., Cusack S. Structure of influenza A polymerase bound to the viral RNA promoter. Nature. 2014; 516(7531): 355-60. Doi: https://doi.org/10.1038/nature14008

14. Da Costa B., Sausset A., Munier S., Ghounaris A., Naffakh N., Le Goffic R., et al. Temperature sensitive mutants in the influenza A virus RNA polymerase: alterations in the PA linker reduce nuclear targeting of the PB1-PA dimer and result in viral attenuation. J. Virol. 2015; 89(12): 3802-5. Doi: https://doi.org/10.1128/JVI.00589-15

15. Biswas S.K., Nayak D.P. Mutational analysis of the conserved motifs of influenza A virus polymerase basic protein 1. J. Virol. 1994; 68(3): 1819-26.

16. Cox N.J., Kitame F., Kendal A.P., Maassab H.F., Naeve C. Identification changes in the cold-adapted live attenuated influenza vaccine strain A/Ann Arbor/6/60 1988 (H2N2). Virology. 1988; 167(2): 554-67.


Для цитирования:


Кост В.Ю., Сухова О.А., Акопова И.И., Горбачёва Е.О., Лисовская К.В., Ртищев А.А., Маркушин С.Г. Включение сайт-специфических мутаций в РВ1-ген вирулентного штамма A/WSN/33 (H1N1) вируса гриппа А меняет его фенотипические характеристики. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии (ЖМЭИ). 2019;(6):21-29. https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-6-21-29

For citation:


Kost V.Y., Sukhova O.A., Akopova I.I., Gorbacheva E.O., Lisovskaya K.V., Rtishchev A.A., Markushin S.G. Inclusion of site-specific mutations in the PB1-gene of a virulent A/WSN/33 (H1N1) strain of influenza A virus changes its phenotypic characteristics. Journal of microbiology epidemiology immunobiology. 2019;(6):21-29. (In Russ.) https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-6-21-29

Просмотров: 50


ISSN 0372-9311 (Print)
ISSN 2686-7613 (Online)