Preview

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии

Расширенный поиск

АНАЛИЗ ЭФФЕКТИВНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ IgY КУР В СЭНДВИЧ-МЕТОДЕ ТЕСТИРОВАНИЯ HBsAg

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2016-3-44-51

Полный текст:

Аннотация

Цель. Изучение антигенсвязывающей способности поликлональных антител (ПКА) кур по сравнению с моноклональными антителами (МКА) мышей на модели взаимодействия с HBsAg. Материалы и методы. Использовали мышиные МКА 18С8 и МКА F3/F4 (IgG), эффективные в иммуноферментном сэндвич-методе определения HBsAg (с минимальной детектируемой дозой 0,017 нг/мл), и аффинно-очищенные анти-HBsAg П КА кур (IgY), полученные от двух иммунизированных птиц(ПКА№1 и ПКА№2). Способность антител связывать HBsAg оценивали по аналитической чувствительности (угловым коэффициентам кривых связывания) твердофазных иммуноферментных систем с использованием МКА мышей и ПКА кур. Результаты. В модельных опытах по связыванию меченного пероксидазой HBsAg ПКА № 2 обеспечивали после адсорбции на полистироловые планшеты статистически значимое 40% увеличение аналитической чувствительности, по сравнению с «эталонными» иммобилизованными М КА 18С8. Однако переход от модельных опытов к применению ПКА № 1 и ПКА № 2 в сэндвич-методе определения HBsAg вместо иммобилизованных МКА 18С8 или детектирующих МКА F3/F4 во всех случаях, напротив, приводил к снижению аналитической чувствительности. Заключение. Предположили, что меньшая гибкость ПКА кур может затруднять бивалентное взаимодействие в сэндвич-методе, приводя к образованию менее стабильных иммунных комплексов. Не отрицая ценности IgY для создания иммунохимических диагностических методов, данные факты и предположения указывают на необходимость более глубокого выяснения наилучших областей их применения.

Об авторах

А. А. Печелюлько
НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова
Россия


Ю. Н. Тараканова
НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова
Россия


А. Д. Дмитриев
НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова
Россия


Ю. С. Массино
НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова
Россия


ОД. .. Сегал
НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова
Россия


В. Ф. Лавров
НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова; Российская медицинская академия последипломного образования
Россия


Д. А. Дмитриев
НИИ вакцин и сывороток им. И.И.Мечникова
Россия


Список литературы

1. Яковлева Д.А., Дмитриев А.Д., Дмитриев Д.А., Массино Ю.С., Павлова Е.В., Пыренкова И.Ю., Смирнова М.Б., Сегал О.Л., Тараканова Ю.Н., Уланова Т.И., Фартушная О.Н., Шарипова И.Н., Коляскина Г.И., Лавров В.Ф. Использование рН-чувствительных иммобилизованных моноклональных антител для оптимизации иммуноферментного сэндвич-метода определения поверхностного антигена вируса гепатита В (HBsAg). Журн. микробиол. 2010, 2: 85-89.

2. Butler J.E., Ni L., Nessler R. et al. The physical and functional behavior of capture antibodies adsorbed on polysterene. J. Immunol. Methods. 1992, 150: 77-90.

3. Camenisch G., Tini M., Chilov D. et al. General applicability of chicken egg yolk antibodies: the performance of IgY immunoglobulins raised against the hypoxia-inducible factor la. FASE В J. 1999, 13:81-88.

4. Dmitriev A. D., Tarakanova J.N., Yakovleva D.A., Dmitriev D.A., PhartooshinaO.V., Kolyaskina G.I., Massino Yu.S., Borisova O.V., Segal O.L., Smirnova M.B., Ulanova T.I., Lavrov V.F. Monoclonal antibodies requiring coating buffer with low pH for efficient antigen capture in sandwich ELISA: the rarities or practically important phenomena? J. Immunoassay. Immunochem. 2013, 34: 414-437.

5. Nikulina V.A., Kizim E.A., Massino Y.S., Segal O.L., Smirnova M.B., Avilov V.V., Saprigin D.B., Smotrov S.P., Tichtchenko V.A., Kolyaskina G.I., Dmitriev A.D. Synergistic effects in antigen-capture ELISA using three monoclonal antibodies directed at different epitopes of the same antigen. Clin. Chim. Acta. 2000, 299: 25-44.

6. Pardue H.L. The inseparable triad: analytical sensitivity, measurement uncertainty, and quantitative resolution. Clin. Chem. 1997, 43: 1831-1837.

7. Poison A:, von Wechmar M.B., Fazakerley G. Antibodies to proteins from yolk of immunized hens. Immunol Commun. 1980, 9: 495-514.

8. Schade R., Calzado E. G., Sarmiento R. et al. Chicken egg yolk antibodies (IgY-technology): a review of progress in production and use in research and human and veterinary medicine. Altem. Lab Anim. 2005, 33: 129-154.

9. Spillner E., Braren I., Greunke K. et al. Avian IgY antibodies and their recombinant equivalents in research, diagnostics and therapy. Biologicals. 2012, 40: 313-22.


Рецензия

Просмотров: 233


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0372-9311 (Print)
ISSN 2686-7613 (Online)