Preview

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии (ЖМЭИ)

Расширенный поиск
Доступ открыт Открытый доступ  Доступ закрыт Только для подписчиков

Изучение влияния полиэлектролитов, обладающих противовирусным действием, на активность нейраминидазы вируса гриппа и процесс окислительного фосфорилирования в митохондриях клеток организма-хозяина

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-4-64-68

Полный текст:

Аннотация

Цель. Изучение ингибирующего действия полиэлектролитов (ПЭ), обладающих противовирусным действием, в отношении нейраминидазы вируса гриппа. Определение типа и константы ингибирования. Изучение влияние полиэлектролитов на процесс окислительного фосфорилирования в митохондриях клеток организма-хозяина. Материалы и методы. В работе использовались очищенные штаммы вируса гриппа: А/ВЧП/Вейбридж (Н7N7), А/Маллард Пенсильвания/10218/84 (H5N2), A/NIBRG-14 (H5N1) с исходным инфекционным титром 4,5 lg ТЦД50/мл. Растворы ПЭ полистиролсульфонат со степенью полимеризации 8 (ПСС-8) в концентрациях 0,5 — 4,0 мМ и полиаллиламин (6 кДа) ПАА (6 кДа) в концентрациях 0,5-4,0 мкМ. Для определения активности нейраминидазы вируса гриппа использовали штаммы вируса гриппа после удаления низкомолекулярных ингибиторов нейраминидазы диализом против бидистиллированной воды. Субстратом нейраминидазы являлся фетуин в конечных концентрациях от 0,052 до 1,2 мкМ для ПАА (6 кДа) и от 0,052 до 1,2 мМ для ПСС-8. В качестве количественных характеристик дыхания и фосфорилирования митохондрий использовали дыхательные коэффициенты по Ларди-Вельману (ДКл) и Чансу-Вильямсу (ДКч), а также отношение АДФ/О. Митохондрии выделяли из скелетных мышц. Определение дыхательных коэффициентов и отношения АДФ/O проводили полярографическим методом. Результаты. Выявлен неконкурентный тип ингибирования указанных ПЭ в отношении нейраминидазной активности вирусов гриппа с константами ингибирования К I = 1,6 ± 0,08 мкМ для ПАА (6 кДа) и К I = 1,7 ± 0,085 мМ для ПСС-8. Определены дыхательные коэффициенты и отношение АДФ/O в отсутствии и после добавления к митохондриям ПСС-8 и ПАА (6 кДа) в концентрациях 20 мМ и 10 мкМ, соответственно. Наблюдалось снижение дыхательных коэффициентов и отношения АДФ/O, что указывало на ингибирование ферментов электрон-транспортной цепи митохондрий. При концентрациях менее 20 мМ и 10 мкМ для ПСС-8 и ПАА (6 кДа) все показатели достоверно не менялись. Заключение. Неконкурентный механизм ингибирования нейраминидазной активности вирусов гриппа ПЭ объясняется конформационными изменениями в молекулах фермента и/или фермент-субстратного комплекса и соответственно структурно-функциональными изменениями его вторичной структуры. При выходе за пределы диапазона нетоксических концентраций 20 мкМ для ПСС-8 и 10 мМ для ПАА (6 кДа) наблюдалось ингибирование ферментов дыхательной цепи митохондрий при сохранении противовирусного эффекта.

Об авторах

Н. А. Контаров
Первый московский государственный медицинский университет им. И.М.Сеченова; НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия

Контаров Николай Александрович, к.б.н.

119991, Москва, ул. Трубецкая, д.8, стр. 2, р.т. (499)246-99-01



И. В. Погарская
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
Москва


Н. В. Юминова
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
Москва


Список литературы

1. Артюшенко С.В., Контаров Н.А., Юминова Н.В., Зверев В.В., Контарова Е.О., Балаев Н.В. Влияние полиэлектролитов на инфекционность вируса кори. Журн. микробиол. 2011, 4: 36-40.

2. Барковский Е.В., Бокуть С.Б., Бородинский А.Н. Современные проблемы биохимии. Минск, Вышэйша школа, 2013.

3. Березин И.В., Клесов А.А. Практический курс химической и ферментативной кинетики. М., МГУ, 1976.

4. Контаров Н.А., Ермакова А.А., Гребенкина Н.С., Юминова Н.В., Зверев В.В. Изучение противовирусной активности полиэлектролитов в отношении вируса гриппа. Вопросы вирусологии. 2015, 60 (4): 5-9.

5. Мейхи Б.В. Дж. Вирусология: Методы. М., Мир, 1988.

6. Chance B., Williams G.R. Respiratory enzymes in oxidative phosphorylation. Kinetics of oxygen utilization. J. Biol. Chem. 1955, 1 (217): 383-393.

7. Lardy H.A., Wellman H. Oxidative phosphorylations; role of inorganic phosphate and acceptor systems in control of metabolic rates. J. Biol. Chem. 1952, 1(195): 215-224.


Для цитирования:


Контаров Н.А., Погарская И.В., Юминова Н.В. Изучение влияния полиэлектролитов, обладающих противовирусным действием, на активность нейраминидазы вируса гриппа и процесс окислительного фосфорилирования в митохондриях клеток организма-хозяина. Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии (ЖМЭИ). 2019;(4):64-68. https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-4-64-68

For citation:


Kontarov N.A., Pogarskaya I.V., Yuminova N.V. Study of the effect of polyelectrolytes with antiviral effect on the activity of influenza virus neuraminidase and the process of oxidative phosphorylation in mitochondrias of cells host organism. Journal of microbiology epidemiology immunobiology. 2019;(4):64-68. (In Russ.) https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-4-64-68

Просмотров: 27


ISSN 0372-9311 (Print)