Preview

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии

Расширенный поиск

Изучение биологических свойств аттенуированных вариантов штамма А/WSN/33, полученных с помощью сайт-специфического мутагенеза РВ2-гена

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2019-2-68-76

Полный текст:

Аннотация

Цель.   Изучение    биологических   свойств   аттенуированных   вариантов    штамма   А/WSN/33(Н1N1)  вируса гриппа  А, полученных  с помощью  сайт-специфического мутагенеза  РВ2-гена. Материалы  и методы. С  помощью  методов  обратной  генетики  получены  сайт-специфические мутанты  штамма  А/WSN/33, имеющие  в РВ2-гене  ts-мутации  из генома  холодоадаптированных (ХА) штаммов-доноров аттенуации:  А/Энн  Арбор/6/60(Н2N2), А/Ленинград/134/17/57(Н2N2), А/Краснодар/101/35/59 (Н2N2). У полученных  сайт-специфических мутантов исследован  ts-фенотип,  att-фенотип, иммуногенность и защитная  эффективность при гомологичном и гетерологичном контрольном заражении. Результаты. Показано, что включение  в РВ2-ген  вирулентного штамма А/WSN/33 как единичных  ts-мутаций, так и комбинации ts-мутаций  из генома известных ХА штаммов-доноров аттенуации  ведет к изменению ts-  и att-фенотипа полученных  сайт-специфических мутантов. Наблюдалось  падение способности к размножению при повышенной температуре и снижение  вирулентности для мышей при интраназальном заражении. Полученные мутанты имели высокую защитную эффективность при гомологическом и гетерологическом контрольном  заражении. Заключение. Полученные данные  позволяют  сделать вывод,  что некоторые сайт-специфические мутанты  не уступают по защитной  эффективности как при гомологичном, так и гетерологичном контрольном заражении ХА реассортантным вакцинным вариантам. Результаты  работы  дают основания рассматривать некоторые  из этих мутантов  как  возможные кандидаты  в живые гриппозные вакцины.

Об авторах

В. Ю. Кост
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия

109044, Москва, 1 Дубровская ул., 15.



А. А. Ртищев
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
109044, Москва, 1 Дубровская ул., 15.


Р. Р. Минтаев
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
109044, Москва, 1 Дубровская ул., 15.


И. И. Акопова
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
109044, Москва, 1 Дубровская ул., 15.


К. В. Лисовская
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия
109044, Москва, 1 Дубровская ул., 15.


С. Г. Маркушин
НИИ вакцин и сывороток им. И.И. Мечникова
Россия

Маркушин Станислав  Георгиевич.

109044, Москва, 1 Дубровская ул., 15; р.т. (495)674-02-47.



Список литературы

1. Алексадрова Г.И., Климов А.И. Живая вакцина против гриппа. Санкт-Петербург, Наука, 1994.

2. Гендон Ю.З., Маркушин С.Г., Цфасман Т.М. и др. Новые холодоадаптированные штаммы-доноры аттенуации для живых вакцин против гриппа. Вопр. вирусол. 2013, 58:11-17.

3. Cox N.J., Kitame F., Kendal A.P. et al. Identification of sequence changes in the cold-adapted, live attenuated influenza vaccine strain A/Ann Arbor/6/60 (H2N2). Virology. 1988, 167:554-567.

4. Cox A., Dewhurst S. A single mutation at PB1 residue 319 dramatically increases the safety of PR8 live attenuated influenza vaccine in a murine model without compromising vaccine efficacy. J. Virol. 2015, 90 (5):2702-2705.

5. Herlocher M.L., Maassab H.F., Webster R.G. Molecular and biological changes in the cold-adapted «master strain» A/ AA/6/60 (H2N2) influenza virus. Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1993, 90:6032-6036.

6. Hoffmann E., Neumann G., Kawaoka Y. et al. A DNA transfection system for generation of influenza A virus from eight plasmids. Proc. Natl. Acad. Sci.USA. 2000, 97(11):6108-6113.

7. Jin H., Zhou H., Lu B.et al. Imparting temperature sensitivity and attenuation in ferrets to A/Puerto Rico/8/34 influenza virus by transferring the genetic signature for temperature sensitivity from cold-adapted A/Ann Arbor/6/60. J. Virol. 2004, 78 (2):995-998.

8. Klimov A.I., Cox N.J., Yotov W. et al. Sequence changes in the live attenuated, cold-adapted variant of influenza A/Leningrad/134/57 (H2N2) virus. Virology. 1992, 186(2):795-797.

9. Lawson C.M., Subbarao E.K., Murphy B.R. Nucleotide sequences changes in the polymerase basic protein 2 gene of temperature-sensitive mutants of influenza A virus. Virology.1992, 191:506-510.

10. Maassab H. Adaptation and growth characteristics of influenza virus at 25 degrees C. Nature. 1967, 213:612-614.

11. McCauley J.W., Penn C.R. The critical cut-off temperature of avian influenza viruses. Virus Res. 1990, 17:191-198.

12. Parkin N., Chiu P., Coelingh K. Genetically engineering live attenuated influenza A virus vaccine candidates. J. Virol. 1997, 71(4):2772-2778.

13. Poleshaev F.I. The conditions of influenza virus ts-recombinants development. Acta virologica. 1978, 22:263-269.

14. Smirnov Y.A. et al. Characterization of adaptation of an avian influenza A (H5N2) virus to mammalian host. Acta virologica. 2000, 44(1):1-8.

15. Snyder M. H., Betts R.F.,De Borde D. et al. Four viral genes independently contribute to attenuation of live influenza A/Ann Arbor/6/60 (H2N2) cold-adapted reassortant virus vaccines. J. Virol. 1988, 62:488-495.

16. Solorzano A.,Li Yo., Perez D.R. Alternative live —attenuated influenza vaccines based on modification in the polymerase genes protect against epidemic and pandemic flu. J. Virol. 2010, 84(9):4587-4596.

17. Song H., Nieto G., Perez D. A new generation of modified live-attenuated avian influenza viruses using a two-strategy combination as potential vaccine candidates. J. Virol. 2007, 81(17):9238-9248.

18. Subbarao E.K., Park E., Lawson C. et al. Secvential addition of temperature-sensitive missense mutations into the PB2 gene of influenza A transfectant viruses can effect an increase in temperature sensitivity and attenuation and permits the rational design of a genetically engineered live influenza A virus vaccine. J. Virol. 1995, 69(10):59-69.

19. Yamanaka K., Ogasawara N., Ueda M. et al. Characterization of a temperature —sensitive mutant in the RNA polymerase PB2 subunit gene of influenza A/WSN/33 virus. Arch. Virol. 1990, 114:65-73.

20. Zhou B., Li Yo., Speer S. et al. Engineering temperature sensitive live attenuated influenza vaccines from emerging viruses. Vaccine. 2012, 30(24):3691-3702.


Просмотров: 336


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0372-9311 (Print)
ISSN 2686-7613 (Online)