Preview

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии

Расширенный поиск

ПРИМЕНЕНИЕ ВРЕМЯПРОЛЕТНОЙ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ ДЛЯ ВЫЯВЛЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЯ БРУЦЕЛЛЕЗА В ОБРАЗЦАХ КРОВИ В ЭКСПЕРИМЕНТЕ

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2017-4-9-17

Полный текст:

Аннотация

Цель. Изучение возможности применения метода времяпролетной масс-спектрометрии для выявления возбудителя бруцеллеза в крови. Материалы и методы. Штаммы бруцелл: 5 Brucella melitensis и 21 Brucella abortus. Белковое профилирование в линейном режиме на MALDI-TOF масс-спектрометре Microflex «Bruker Daltonics». Результаты. Модифицирована и оптимизирована методика обеззараживания и пробоподготовки образцов крови, контаминированной бруцеллами, для анализа методом MALDI-TOF MS. Получены 120 репрезентативных белковых профилей экстрактов образцов крови, содержащей возбудитель бруцеллеза. Сформирован и проанализирован результирующий пик-лист (супер-спектр) исследуемой белковой фракции экстракта крови условно здорового человека в пределах исследуемой группы. Заключение. Предложена схема выявления бруцелл в образцах крови методом MALDI-TOF масс-спектрометрии, основанным на выявлении комплекса 15 родоспецифичных фрагментов. Охарактеризованы сигналы на масс-спектрах экстрактов лейкоцитарной фракции крови, искусственно контаминированной возбудителем бруцеллеза.

Об авторах

Д. В. Ульшина
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


Д. А. Ковалев
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


Д. Г. Пономаренко
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


Д. В. Русанова
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


Н. М. Швецова
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


Т. В. Таран
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


И. В. Кузнецова
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


А. М. Жиров
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


А. А. Хачатурова
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


И. Ю. Борздова
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


А. Н. Куличенко
Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


Список литературы

1. Ломинадзе Г.Г., Семенова Е.А., Мотузова О.В., Калакуцкая А.Н., Лазарева А.В. Использование метода MALDI-TOF масс-спектрометрии для ускорения идентификации микроорганизмов в гемокультурах пациентов с подозрением на сепсис. Лаборатория ЛПУ. 2014,4: 17-20.

2. Лямкин Г.И., Пономаренко Д.Г., Худолеев А.А., Русанова Д.В., Вилинская С.В., Куличенко А.Н. Обзор эпидемиологической ситуации по бруцеллезу в Российской Федерации в 2015 г. и прогноз на 2016 г. Проблемы особо опасных инфекций. 2016, 2: 11-13.

3. Ульшина Д.В., Ковалев Д.А., Бобрышева О.В., Лямкин Г.И., Худолеев А.А., Сирица Ю.В., Куличенко А.Н. Разработка алгоритма идентификации культур возбудителя бруцеллеза методом MALDI-TOF масс-спектрометрии. Проблемы особо опасных инфекций. 2015, 4: 96-99.

4. Baranov А.А., Mayanskii A.N., Mayanskii N.A. A new epoch in medical microbiology. Her. Russ. Acad. Sci. 2015, 85 (6): 515-522.

5. Ferreira L., Castano S.V., Sanchez-Juanes F. et al. Identification of Brucella by MALDI-TOF mass spectrometry. Fast and reliable identification from agar plates and blood cultures. PLoS One. 2010,5 (12): 14235.

6. GrunowR., Jacob D., Klee S. et al. Brucellosis in a refugee who migrated from Syria to Germany and lessons learnt. Euro Surveill. 2016, 21 (31): 1-4.

7. Karger A., Melzer F., Tirnke M. et al. Interlaboratory comparison ofintact-cell matrix-assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry results for identification and differentiation of Brucella spp. J. Clin. Microbiol. 2013, 51 (9): 3123-3126.

8. Lasch P., Wahab T., Weil S. et al. Identification of highly pathogenic microorganisms by matrixassisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry: Results of an interlaboratory ring trial. J. Clin. Microbiol. 2015, 53 (8): 2632-2640.

9. Lista F., Reubsaet F., De Santis R. et al. Reliable identification at the species level of Brucella isolates with MALDI-TOF-MS. BMC Microbiology. 2011, 11: 267.

10. Nyvang H.G., Kvistholm J.A., Bocher S. et al. Mass spectrometry: pneumococcal meningitis verified and Brucella species identified in less than half an hour. Scand. J. Infect. Dis. 2010, 42 (9): 716-718. v

11. Sedo O., Sedlacek I., Zdrahal Z. Sample preparation methods for MALDI-MS profiling of bacteria. Mass Spectrometry Reviews. 2011, 30 (3): 417-434.

12. Vitr M.A., Mambres D.H., Deghelt M. et al. Brucella melitensis invades murine erythrocytes during infection. Infect. Immunity. 2014, 82 (9): 3927-3938.

13. Yonetani S., Olmishi H., Ohkusu K. et al. Direct identification of microorganisms from positive blood cultures by MALDI-TOF MS using an in-house saponin method. Intern. J. Infect. Dis. 2016, 52: 37-42.

14. Zamanian M., Hashemi Tabar G.R., Rad M. et al. Evaluation of different primers for detection of Brucella in human and animal serum samples by using PCR method. Archives Iranian Medicine. 2015, 18 (1): 44-50.


Рецензия

Просмотров: 127


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0372-9311 (Print)
ISSN 2686-7613 (Online)