Preview

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии

Расширенный поиск

КОНСТРУИРОВАНИЕ ТЕСТ-СИСТЕМЫ С НАНОЧАСТИЦАМИ КОЛЛОИДНОГО СЕРЕБРА ДЛЯ ОБНАРУЖЕНИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ ПСЕВДОТУБЕРКУЛЕЗА И КИШЕЧНОГО ИЕРСИНИОЗА В ДОТ-ИММУНОАНАЛИЗЕ

https://doi.org/10.36233/0372-9311-2017-1-55-61

Полный текст:

Аннотация

Цель. Конструирование иммунологической тест-системы для обнаружения возбудителей энтеропатогенных иерсиний (Yersinia pseudotuberculosis и Y. enterocolitica) методом дот-иммуноанализа. Материалы и методы. В качестве маркера специфических антител использовали наночастицы коллоидного серебра размером 5 - 9 нм. IgG фракцию выделяли из коммерческих антисывороток к псевдотуберкулезным (0:1) и кишечноиерсиниозным (0:3 и 0:9) микроорганизмам. Испытание полученной тест-системы проведено на 20 штаммах Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica (по десять каждого вида). Результаты. Дот-анализ имел специфический характер и обнаруживал энтеропатогенные иерсинии в концентрации 5-105 - 8-106 м.к./мл (100 - 1000 м.к. в пробе). При этом не наблюдалось перекрестного реагирования с гетерологичными исследованными микроорганизмами - Escherichia coli, Salmonella typhimurium, Shigella flexneri, Yersinia pestis EV. Показана возможность одновременного обнаружения и серотипирования Y. enterocolitica, что является обязательным для подтверждения их эпидемической значимости. Заключение. Разработанные тест-системы позволяют исследовать микрообъемы испытуемых проб (1 мкл), экспрессны (1,5 - 2 ч), высокочувствительны и специфичны, технически просты и не требуют использования дорогостоящего оборудования, специальной подготовки персонала, могут с успехом применяться в практическом здравоохранении в лабораториях разного уровня оснащенности.

Об авторах

Т. Ю. Загоскина
Иркутский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


М. В. Чеснокова
Иркутский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


В. Т. Климов
Иркутский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


Ю. О. Попова
Иркутский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


Е. Ю. Марков
Иркутский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


О. А. Старикова
Иркутский научно-исследовательский противочумный институт
Россия


Список литературы

1. Бургасова О.А., Куляшова Л.Б., Ценева Г.Я. Сравнительная оценка различных иммунологических реакций в динамике псевдотуберкулеза. Журн. микробиол. 1996, 2: 48-51.

2. Загоскина Т.Ю., Балахонов С.В., Марков Е.Ю., Николаев В.Б., СубычеваЕ.Н., Чапор-гина Е.А., Михайлов Е.П., Бодрых О.Б., Попова Ю.О. Апробация диагностических тест-систем с использованием наночастиц серебра в качестве маркеров специфических антител для скрининга исследуемого материала на наличие антигенов возбудителей чумы, бруцеллеза, туляремии и ботулотоксина в дот-иммуноанализе. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2014, 4: 61-64.

3. Загоскина Т.Ю., Балахонов С.В. ,ЧапоргинаЕ.А., Марков Е.Ю., Гаврилова О. В., Бодрых О. Б., Долгова Т.М., Тайкова Т. С., Иванова Т. А., Попова Ю. О., Корнева А. В. Сравнительная оценка методов детекции ботулотоксина в клиническом материале от больных людей. Эпидемиология и вакцинопрофилактика. 2014, 4: 65-68.

4. Загоскина Т.Ю., Калиновский А.И., Марков Е.Ю., Докорина А.А., Голубинский Е.П. Использование специфических антител, меченных частицами коллоидного серебра, для выявления антигенов бруцелл методом дот-иммуноанализа. Клин. лаб. диагностика. 2002, 6: 38-39.

5. Загоскина Т.Ю., Марков Ю.Е., Калиновский А.И., Голубинский Е.П. Обнаружение антигенов бруцелл с помощью частиц коллоидных металов в качестве маркеров специфических антител. Журн. микробиол. 2001, 3: 65-69.

6. Загоскина Т. Ю., Чапоргина Е. А., Марков Е. Ю., Попова Ю. О., Соловьев С. Ю., Андреевская Н. М., Балахонов С. В. Совершенствование тест-системы для скрининга материала на ботулотоксин в дот-иммуноанализе. Бюлл. ВСНЦ СО РАМН. 2015, 1 (101): 60-62.

7. Иерсинии и иерсиниозы. Г.Я. Ценева (ред.). СПб, Медмассмедиа, 2006.

8. Куляшова Л.Б., Ценева Г.Я., Буйневич Ю.Б. Роль антигенов наружной мембраны Yesinia pseudotuberculosis в патогенезе и диагностике псевдотуберкулеза. Журн. микробиол. 1997, 1: 14-18.

9. Носкова О.А., Загоскина Т.Ю., Субычева Е.Н., Марков Е.Ю., Попова Ю.О., Гриднева Л.Г., Михайлов Е.П. Применение дот-иммуноанализа для выявления антигенов чумного микроба в полевом материале. Проблемы ООН. 2014, 3: 69-71.

10. Смирнова Е.Ю. Совершенствование лабораторного обеспечения системы эпидемиологического надзора за иерсиниозами: Автореф. дис. канд. мед. наук. СПб, 2003.

11. Сомов Г.П., Покровский В.И., Беседнова ГЕН., Антоненко Ф.Ф. Псевдотуберкулез. М.: Медицина, 2001.

12. Ценева Г.Я., Куляшова Л.Б., Белая Ю.А., Быстрова С.М. Применение псевдотуберкулезного коаглютинирующего антительного диагностикума в лабораторной практике. Лаб. дело. 1995,2: 111-113.

13. Шпилюк Г.Ф., Головешкина Т.Н., Володина И.К. и др. Иммуноглобулиновые латексные препараты для экспресс диагностики иерсиниозов. Журн. микробиол. 1993, 6: 92-93.

14. McKinney М. М., Parkinson A. A simple, non-chromatographic procedure to purify immunoglobulins from serum and ascites fluid. J. Immunol. Meth. 1987, 96 (2): 271-278.


Рецензия

Просмотров: 180


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 0372-9311 (Print)
ISSN 2686-7613 (Online)