Журналов:     Статей:        

Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2021; 98: 481-485

Сравнительная оценка гидролизатов как основы при конструировании питательной среды для культивирования Listeria monocytogenes

Хаптанова Н. М., Остяк А. С., Лукьянова С. В., Кузнецов В. И., Андреевская Н. М., Адамович С. Н., Ушаков И. А., Юденич С. В., Балахонов С. В.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-108

Аннотация

Цель работы — провести сравнительную оценку панкреатических гидролизатов, полученных из рыбы и кальмаров, для подбора оптимальной питательной среды для культивирования Listeria monocytogenes.

Материалы и методы. В работе использовали следующее сырье: сельдь тихоокеанскую (Clupea pallasii), минтай (Gadus chalcogrammus), плотву сибирскую (Rutilus rutilus lacustris) — сорогу, кальмар европейский (Loligo vulgaris). Сырье подвергали ферментативному гидролизу с помощью поджелудочной железы (по Хоттингеру). Проводили исследование физико-химических свойств панкреатических гидролизатов (аминный азот, кислотность, аминокислотный состав).Специфическую активность питательных сред при культивировании тест-штамма L. monocytogenes 766 оценивали комплексом микробиологических методов.

Результаты и обсуждение. Наибольшее содержание аминного азота в конце ферментативного гидролиза выявлено в панкреатическом гидролизате сороги (6%), кислотность гидролизата сороги оставалась стабильной с 6-х до 13-х суток процесса гидролиза (рН 7,2). Панкреатические гидролизаты содержали ряд аминокислот, которые являются наиболее существенными для роста листерий. При оценке биологических свойств питательных сред, приготовленных на основе полученных гидролизатов, наилучшие результаты отмечены у питательной среды на основе панкреатического гидролизата сороги. При культивировании L. monocytogenes 766 установлено, что тест-штамм сохранял морфологические и культуральные свойства и не проявлял признаков диссоциации.

Заключение. Результаты исследований показали, что панкреатический гидролизат сороги является перспективной белковой основой для конструирования экспериментальной листериозной среды.

Список литературы

1. Ковтун Ю.С., Курилова А.А., Таран Т.В., Катунина Л.С., Чурикова Н.В. Сравнительная оценка потенциальных белковых основ микробиологических сред. Проблемы особо опасных инфекций. 2014, (3): 92–5.

2. Шепелин А.П. Современное состояние и тенденции в разработке, производстве и применении питательных сред. Бактериология. 2016, 1(1): 42–7. https://doi.org/10.20953/2500-1027-2016-1-42-47

3. Сизоненко М.Н., Тимченко Л.Д., Ржепаковский И.В., Катунина Л.С. Влияние биологически активных субстанций на основе эмбриональных тканей перепелов на биологические свойства Listeria monocytogenes. Ветеринарная патология. 2017, (1): 34–9.

4. Поляк М.С., Сухаревич В.И., Сухаревич М.Э. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии. СПб.: ЭЛБИ-СПб., 2008.

5. Насыпаева Е.Н., Лещенко А.А. Сравнительный анализ способов приготовления питательных основ из продуктов переработки молока. В кн.: Всероссийская ежегодная научно-практическая конференция «Общество, наука, инновации». Киров, 2014: 154–5.

6. Шепелин А.П., Шолохова Л.П., Марчихина И.И., Полосенко О.В. Панкреатический гидролизат рыбной кормовой муки – полноценная белковая основа питательных сред. В кн.: Материалы IV Национального конгресса бактериологов и Международного симпозиума «Микроорганизмы и биосфера "Microbios-2018"». Омск, 2018: 82–3.

7. Дятлов И.А., Кутырев В.В., Храмов М.В. Питательные среды для выделения, культивирования и идентификации возбудителей особо опасных инфекций бактериальной природы. М., 2012.

8. Кузьмина Н.Е., Моисеев С.В., Крылов В.И., Кутин А.А., Яшкир В.А., Меркулов В.А. Валидация методики определения аминокислотного состава фармацевтической субстанции «Глатирамера ацетат» методом ЯМР спектроскопии. Ведомости Научного центра экспертизы средств медицинского применения. 2017, 7(3): 175–81.

9. Simmler C., Napolitano J.G., McAlpine J.B., Chen S.N., Pauli G.F. Universal quantitative NMR analysis of complex natural samples. Curr. Opin. Biotechnol. 2014, 25: 51–9. https://doi.org/10.1016/j.copbio.2013.08.004

10. Fan T.W., Lane A.N. Applications of NMR spectroscopy to systems biochemistry. Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 2016, 92-93: 18–53. https://doi.org/10.1016/j.pnmrs.2016.01.005

Journal of microbiology, epidemiology and immunobiology. 2021; 98: 481-485

Comparative evaluation of hydrolysates as a basis for the construction of a nutrient medium for the cultivation of Listeria monocytogenes

Khaptanova N. M., Ostyak А. S., Lukyanova S. V., Kuznetsov V. I., Аndreevskaya N. M., Adamovich S. N., Ushakov I. A., Yudenich S. V., Balakhonov S. V.

https://doi.org/10.36233/0372-9311-108

Abstract

The objective is to perform a comparative evaluation of the pancreatic hydrolysates prepared from fish and squid to determine the optimal culture medium for Listeria monocytogenes.

Materials and methods. The following raw materials were used in the study: Pacific Herring (Clupea pallasii), Alaska Pollock (Gadus chalcogrammus), Common Roach (Rutilus rutilus lacustris), European Squid (Loligo vulgaris). The raw materials were subjected to enzymatic hydrolysis using the pancreas (according to Hottinger). A study of the physicochemical properties of pancreatic hydrolysates (content of free amino nitrogen (FAN), acidity of fish hydrolysates, the amino acid composition) was carried out.. The specific activity of nutrient media during the cultivation of the test strain L. monocytogenes 766 was assessed by a complex of microbiological methods.

Results and discussion. The highest content of FAN at the end of enzymatic hydrolysis was observed in the pancreatic hydrolysate of the common roach (6%), the acidity of the hydrolysate remained stable from 6th to 13th day of the hydrolysis process (pH 7.2). Pancreatic hydrolysate of the common roach contained a number of amino acids that are most essential for the growth of Listeria. An assessment of the biological properties of nutrient media prepared on the basis of the obtained hydrolysates demonstrated that the best results in terms of sensitivity and germination of L. monocytogenes 766 showed a nutrient medium based on the pancreatic hydrolysate of the common roach. During the cultivation of L. monocytogenes 766 the test strain retained its morphological and cultural properties and did not show signs of dissociation.

Conclusion. The research results have shown that the pancreatic hydrolysate of the common roach is a promising protein basis for the construction of an experimental environment for listeria.

References

1. Kovtun Yu.S., Kurilova A.A., Taran T.V., Katunina L.S., Churikova N.V. Sravnitel'naya otsenka potentsial'nykh belkovykh osnov mikrobiologicheskikh sred. Problemy osobo opasnykh infektsii. 2014, (3): 92–5.

2. Shepelin A.P. Sovremennoe sostoyanie i tendentsii v razrabotke, proizvodstve i primenenii pitatel'nykh sred. Bakteriologiya. 2016, 1(1): 42–7. https://doi.org/10.20953/2500-1027-2016-1-42-47

3. Sizonenko M.N., Timchenko L.D., Rzhepakovskii I.V., Katunina L.S. Vliyanie biologicheski aktivnykh substantsii na osnove embrional'nykh tkanei perepelov na biologicheskie svoistva Listeria monocytogenes. Veterinarnaya patologiya. 2017, (1): 34–9.

4. Polyak M.S., Sukharevich V.I., Sukharevich M.E. Pitatel'nye sredy dlya meditsinskoi i sanitarnoi mikrobiologii. SPb.: ELBI-SPb., 2008.

5. Nasypaeva E.N., Leshchenko A.A. Sravnitel'nyi analiz sposobov prigotovleniya pitatel'nykh osnov iz produktov pererabotki moloka. V kn.: Vserossiiskaya ezhegodnaya nauchno-prakticheskaya konferentsiya «Obshchestvo, nauka, innovatsii». Kirov, 2014: 154–5.

6. Shepelin A.P., Sholokhova L.P., Marchikhina I.I., Polosenko O.V. Pankreaticheskii gidrolizat rybnoi kormovoi muki – polnotsennaya belkovaya osnova pitatel'nykh sred. V kn.: Materialy IV Natsional'nogo kongressa bakteriologov i Mezhdunarodnogo simpoziuma «Mikroorganizmy i biosfera "Microbios-2018"». Omsk, 2018: 82–3.

7. Dyatlov I.A., Kutyrev V.V., Khramov M.V. Pitatel'nye sredy dlya vydeleniya, kul'tivirovaniya i identifikatsii vozbuditelei osobo opasnykh infektsii bakterial'noi prirody. M., 2012.

8. Kuz'mina N.E., Moiseev S.V., Krylov V.I., Kutin A.A., Yashkir V.A., Merkulov V.A. Validatsiya metodiki opredeleniya aminokislotnogo sostava farmatsevticheskoi substantsii «Glatiramera atsetat» metodom YaMR spektroskopii. Vedomosti Nauchnogo tsentra ekspertizy sredstv meditsinskogo primeneniya. 2017, 7(3): 175–81.

9. Simmler C., Napolitano J.G., McAlpine J.B., Chen S.N., Pauli G.F. Universal quantitative NMR analysis of complex natural samples. Curr. Opin. Biotechnol. 2014, 25: 51–9. https://doi.org/10.1016/j.copbio.2013.08.004

10. Fan T.W., Lane A.N. Applications of NMR spectroscopy to systems biochemistry. Prog. Nucl. Magn. Reson. Spectrosc. 2016, 92-93: 18–53. https://doi.org/10.1016/j.pnmrs.2016.01.005